猴組織蛋白酶ELISA試劑盒操作注意事項

 　　猴組織蛋白酶ELISA試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗猴CTSK抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的猴CTSK與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗猴CTSK抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。
　　抗猴CTSK抗體與結(jié)合在包被抗體上的猴CTSK結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,猴CTSK濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中猴CTSK的濃度。
　　
　　標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。
　　猴組織蛋白酶ELISA試劑盒操作注意事項：
　　1、實驗應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀釋過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存
　　2、實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
　　3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
　　4、使用一次性的吸頭以免交叉感染，吸取終止液和底物A,B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器
　　5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混合試劑盒盒里的各種成分及樣品
　　6、底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴漏于光下。避免用手接，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
　　7、加入試劑的順序一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
　　8、按照說明書中標明的時間,加液的量及順序進行溫育操作。